液相色谱仪的新色谱柱需要进行活化处理,以保证分析结果的准确性。新的色谱柱活化:采用100%甲醇1ml/min冲洗60min,再换成流动相进行平衡;如果流动相中含有缓冲盐,在换成流动相前,请使用过渡流动相过渡后再换流动相平衡。
2 .日常维护
(1)建议检测前样品和活动相进行过滤;
(2)建议每天完成样品后应及时清洗样品;
(3)常规试验后,直接选择90%的有机相进行45 min,后保存在纯甲醇或纯乙腈中。
(4)运用缓冲盐条件:
(5)等效条件:使用缓冲盐前后,用过渡相以1 ml/min的流速冲洗45分钟。
(6) 梯度条件:运用缓冲盐之前与初始活动相组成相同的过渡活动相以1ml/min流速冲)刷45min; 留意:过渡活动相是指有机相和水相份额与分析活动相相同份额,只是不含有缓冲盐;
(7)缓冲盐冲刷干净后,选用90%有机相反向冲刷60min,终保存在纯有机溶剂中; 留意:假如运用缓冲液不能存留色谱柱中过夜;
3 .色谱柱的保存
(1)色谱柱在短时间内保存,间隔不超过四天的,色谱柱不需要特殊维护,只根据终试验中所用活性相或样品的性质,使用后可用纯甲醇洗脱,纯水或甲醇和水的混合溶液,直到基线被压平约半小时。
(2)色谱柱长期保存时,好先将hplc其从高效液相色谱仪上除去,然后用合适的溶剂淋洗,洗去不合适与色谱柱的洗脱液,保留色谱柱。例如,C18反相柱可以用纯甲醇或乙腈保存,然后用塑料塞填充,避免在色谱柱内完全干燥。